Generelle spørgsmål

• Hvad gør Biowest til specialist i cellekultur?

  Med mere end 35 års erfaring med serum som kerneområde skiller Biowest sig ud gennem sit fokus på kvalitet og service. Takket være virksomhedens vertikale integration tilbyder Biowest verdens bredeste udvalg af geografiske oprindelser og er dermed en central specialist inden for cellekultur.

  Biowest samarbejder tæt med forskningslaboratorier, akademiske institutioner og medicinalvirksomheder verden over. Ved at levere cellekulturmedier af høj kvalitet, tilpasset det enkelte projekts behov, spiller Biowest en vigtig rolle i videnskabelige opdagelser, kliniske forsøg og udviklingen af nye behandlinger.

  Biowest adskiller sig gennem sit engagement i en vertikalt integreret forsyningskæde, der opfylder de højeste standarder for kvalitet, sporbarhed og sikkerhed. I 2004 blev virksomheden opkøbt af Serascandia-koncernen og blev dermed den første vertikalt integrerede serumvirksomhed.

  Samme år indberettede Biowest tilfælde af fejlagtige deklarationer til myndighederne og informerede de berørte parter. Virksomheden fremhævede betydningen af retningslinjer og sporbarhedskontrol i serumindustrien og støttede etableringen af ISIA (International Serum Industry Association) og ESPA (European Serum Producers Association). Det viser Biowests engagement i professionel etik og ansvarlig praksis i serumindustrien.

• Hvorfor vælge Biowest som serumleverandør?

  Biowest garanterer et højt niveau af kvalitet, sporbarhed og biosikkerhed. Det understøttes blandt andet af ISO 9001-certificeringen, som blev opnået i 2006 og genvalideres hvert tredje år af et akkrediteret organ, omfattende dokumentation og leverandøraudits gennem hele produktionsprocessen.

• Hvad betyder betegnelsen ESPA?

  ESPA står for European Serum Producers Association. Organisationens formål er at fremme anvendelsen af serum, harmonisere regler, forbinde virksomheder i serumforarbejdningsindustrien i og uden for EU samt repræsentere deres interesser.
  Læs mere via dette link: https://serumproducts.eu/

• Hvad er OIE (Verdensorganisationen for Dyresundhed)?

  OIE (Verdensorganisationen for Dyresundhed, i dag WOAH) er en mellemstatslig organisation, der blev oprettet i 1924.
  I 2011 havde OIE 178 medlemslande og territorier.

  Organisationens opgaver er:

  • at sikre gennemsigtighed om den globale situation for dyresygdomme
  • at indsamle, analysere og formidle veterinærvidenskabelig information
  • at stille ekspertise til rådighed og fremme international solidaritet i bekæmpelsen af dyresygdomme
  • at beskytte verdenshandlen ved at offentliggøre sundhedsstandarder for international handel med dyr og animalske produkter
  • at forbedre de juridiske rammer og ressourcer for nationale veterinærtjenester.

• Hvorfor er sporbarhed vigtig, og hvordan garanterer Biowest den?

  Sporbarhed er afgørende, fordi den skaber en sammenhængende produktidentitet fra oprindelsesland og slagteri til produktion, emballering og mærkning før det endelige salg og distribution. Sporbarheden sikrer, at vores produkter overholder gældende regler i alle procestrin og giver fuld gennemsigtighed og dokumenteret overensstemmelse.

  Hos Biowest garanterer vi sporbarheden gennem et stringent overvågningssystem i hele produktionsprocessen. Vi registrerer og administrerer omhyggeligt oplysninger om produktets oprindelse, produktionsforhold, forarbejdningstrin og kvalitetskontroller. Biowest opretholder en ubrudt produktionskæde.

  Vores fokus på sporbarhed betyder, at vi kan opretholde en ubrudt informationskæde og dermed dokumentere vores produkters oprindelse og kvalitet.

• Er Biowests produkter sterile?

  Medmindre andet fremgår af produktetiketten, er Biowests sera og flydende medier sterilfiltrerede. Steriliteten kan ikke garanteres efter åbning. Det anbefales at anvende aseptiske håndteringsteknikker. Prøvetagning til sterilitetstest af alle Biowest-produkter følger kravene i Den Europæiske Farmakopé.

• Hvad med dyrevelfærd og etik?

  Biowest tillægger dyrevelfærd stor betydning. Produktionen af animalske sera følger principperne for dyrevelfærd fastsat af OIE – Verdensorganisationen for Dyresundhed – i Terrestrial Animal Health Code 2012, bind I, afsnit 7.
  For føtalt bovint serum (FBS) anvender Biowest udelukkende blod, der indsamles som et biprodukt fra køer, som slagtes til human konsum.

  For at garantere en etisk produktion har vi indført indsamlingsprocedurer, der eliminerer risikoen for at påføre fosteret smerte. Føtalt bovint blod indsamles kun, når fosteret ikke udviser livstegn (OIE – Terrestrial Animal Health Code 2012, bind I, artikel 7.5.5.).

Føtalt bovint serum (FBS)

• Hvad er FBS?

  Serum er den flydende komponent, der udvindes fra koaguleret fuldblod efter centrifugering. Det fremstilles af blod fra bovine fostre, som indsamles aseptisk på slagteriet. Føtalt bovint serum anvendes bredt og er nødvendigt til dyrkning af mange cellelinjer, fordi det tilfører en lang række næringsstoffer og gør det muligt for cellerne at proliferere in vitro. Føtalt bovint blod indsamles kun, når fosteret ikke udviser livstegn.

• Hvordan anvendes FBS?

  Celler in vitro har brug for et næringsmedium eller cellekulturmedium for at vokse. Det består af et basalmedium og forskellige supplementer. Føtalt bovint serum tilsættes som supplement til cellekulturmediet, typisk i en koncentration på 10 %.

• Hvilke anvendelser bruges FBS til?

  Føtalt bovint serum anvendes inden for en lang række områder. Det vigtigste er biopharmaceutiske produkter og vacciner. Serum bruges til forskning, fremstilling og kontrol af vacciner og lægemidler til mennesker og dyr, hvoraf mange befinder sig i frontlinjen af udviklingen.

  Føtalt bovint serum anvendes desuden i vid udstrækning inden for forskning.

• Findes der alternativer til FBS?

  Der findes serumfri alternativer, eksempelvis FreeAdd (ref.: S6010). Da forskellige celletyper har forskellige krav, kan anvendelsen være kompleks og omkostningstung.

• Hvordan vælges FBS til stamceller?

  For at vælge et højtydende FBS til stamcellekultur anbefaler Biowest, at forskellige lotnumre testes på de relevante cellelinjer. Biowest tilbyder kvalificerede FBS-lotnumre til stamcellekultur (ref.: S181S). Dr. Yamanaka, nobelprismodtager inden for stamcelleforskning, valgte et af Biowests FBS-lotnumre til flere af sine forsøg.

• Hvordan fremstilles FBS?

  Føtalt bovint serum fremstilles af koaguleret og centrifugeret blod fra bovine fostre, som indsamles aseptisk på slagteriet. Blodet indsamles fra fostre fra drægtige køer, der er slagtet i overensstemmelse med OIE’s retningslinjer og internationalt anerkendte standarder for veterinærkontrol. Føtalt bovint blod indsamles kun, når fosteret ikke udviser livstegn.

• Kan serumets oprindelse påvirke kvaliteten?

  Serumets oprindelse har ingen indflydelse på cellevæksten. Biowest sammenlignede cellevækst i FBS fra syv forskellige lande på tre kontinenter og bekræftede, at alle testede cellelinjer havde samme gennemsnitlige ydeevne uanset oprindelsesland.

  Et bestemt FBS-lotnummer kan give gode resultater for én cellelinje, men ikke for en anden. Serumkvaliteten er derfor specifik for den enkelte cellelinje. Derfor anvendes FBS-testning bredt ved følsomme cellelinjer. Biowest udfører omfattende analyser af biokemiske parametre og tests på relevante cellelinjer og gør resultaterne tilgængelige i analysecertifikaterne.

• Hvorfor er FBS billigere i Europa end i USA?

  Det skyldes reglerne for import af FBS, som er mindre restriktive i Europa end i USA. International Serum Industry Association (ISIA) støtter arbejdet med at harmonisere importreglerne og anbefaler overholdelse af OIE’s retningslinjer. Indtil videre er FBS i USA fortsat mere end dobbelt så dyrt som i Europa.

• Hvorfor stiger efterspørgslen efter FBS?

  Efterspørgslen efter FBS stiger i takt med den seneste forskningsudvikling, særligt inden for stamceller, celleterapi, nye vacciner og proteomik.

• Hvorfor stiger efterspørgslen efter FBS?

  Efterspørgslen efter FBS stiger i takt med den seneste forskningsudvikling, særligt inden for stamceller, celleterapi, nye vacciner og proteomik.

• Hvilken betydning har tetracykliner i FBS?

  Tetracykliner er en familie af bredspektrede antibiotika, der hæmmer bakteriers proteinsyntese ved at blokere bindingen af aminoacyl-tRNA til ribosomet. På grund af stigende bekymring for udviklingen af antibiotikaresistente mikroorganismer blev brugen af tetracyklin som vækstfremmer forbudt i EU i begyndelsen af 1970’erne. I resten af verden er tetracyklin dog fortsat blandt de hyppigst anvendte antibiotika i husdyrproduktionen.

  Siden 1992 har tetracyklinregulerede transkriptionssystemer været anvendt til at aktivere (Tet-on) eller hæmme (Tet-off) ekspressionen af bestemte gener i cellelinjer eller dyremodeller. Begge systemer er meget følsomme over for selv små mængder tetracyklin i FBS. Tetracyklinfrit FBS gør det muligt at kontrollere induktionen af disse systemer i forskellige anvendelser.

  Kontakt din Biowest-repræsentant for yderligere information eller hjælp til at vælge det lotnummer, der passer bedst til din tetracyklinfølsomme anvendelse.

Cellekulturmedier

• Hvad er cellekultur?

  Cellekultur, eller in vitro-kultur, er en samlet betegnelse for teknikker, der gør det muligt primært at opretholde animalske celler uden for deres oprindelige vævsmiljø under kontrollerede betingelser.

• Hvad er et cellekulturmedium?

  Et cellekulturmedium indeholder alle de komponenter, der er nødvendige for cellernes overlevelse og vækst. Det består af et basalmedium, som er en kompleks blanding af mineralsalte, kulhydrater, vitaminer, aminosyrer, metaboliske forstadier, vækstfaktorer, hormoner og sporstoffer, samt supplementer som FBS.

• Hvorfor er serum nødvendigt i cellekultur?

  Serum, særligt føtalt bovint serum, er rigt på proteiner, sporstoffer og vækstfaktorer, der understøtter celleproliferation. Det indeholder også adhæsionsfaktorer, som skaber en belægningseffekt på plastoverfladen og dermed øger cellernes vedhæftning. På grund af de mange komponenter er serum et centralt produkt i cellekultur.

Cellekulturreagenser

• Er det normalt, at trypsinprodukter ikke altid har samme farve?

  Visse trypsinpræparater indeholder phenolrødt. Da produktet sendes med tøris, kan der ophobes en betydelig mængde CO₂ i emballagen.

  CO₂ kan trænge ind i opløsningen og sænke pH en smule, hvilket kan give en orange farve omkring pH 6,5 eller en rødlig-pink farve omkring pH 7,3. Hvis opløsningen er orange og dermed sur, kan den stadig anvendes som den er, eller pH kan justeres med natriumhydroxid.

• Hvad er forskellen på L-glutamin og stabiliseret glutamin?

  L-glutamin er en essentiel aminosyre for cellernes stofskifte og den naturlige, klassiske form for glutamin. Ulempen er den høje varmefølsomhed, som gør stoffet let nedbrydeligt under cellekulturbetingelser. Stabiliseret glutamin, eksempelvis dipeptidet L-alanyl-L-glutamin, er modificeret for at opnå væsentligt større stabilitet og dermed generelt bedre effektivitet. Bemærk, at visse celletyper ikke kan udnytte modificeret L-glutamin.

Basalmedium

• Hvad består et basalmedium af?

  Et basalmedium består af næringsstoffer til cellerne, eksempelvis mineralsalte, aminosyrer og kulhydrater, samt komponenter, der opretholder pH og osmolalitet, såsom bufferopløsninger og phenolrødt.

• Hvad er formålet med et basalmedium i cellekultur?

  Et basalmedium tilfører næringsstoffer, der er nødvendige for cellernes overlevelse og vækst, eksempelvis aminosyrer og kulhydrater. Det gør det samtidig muligt at opretholde osmolalitet og pH på et fysiologisk niveau.

• Ved hvilken temperatur skal et basalmedium opbevares?

  Basalmedier opbevares normalt ved +4 °C til +8 °C og beskyttet mod lys.

• Hvor længe kan et basalmedium opbevares?

  Et uåbnet basalmedium kan opbevares ved +4 °C til +8 °C indtil udløbsdatoen på flasken og analysecertifikatet. Efter åbning er basalmediet stabilt i to uger.

• Hvorfor er basalmediet rødt eller pink?

  Basalmedier indeholder normalt pH-indikatoren phenolrødt. Komponenten bliver gul, når mediet bliver surt, og fuchsiapink, når pH er basisk.

Serum

• Hvilken rolle spiller serum i cellekultur?

  Serum indeholder en rig sammensætning af proteiner, sporstoffer og vækstfaktorer og tilfører dermed de næringsstoffer og komponenter, der er nødvendige for cellernes overlevelse, proliferation og vækst.

• Hvad er den bedste metode til optøning af serum?

  Serum bør optøs ved +2 °C til +8 °C for at forhindre nedbrydning af mitogene faktorer. Det kan også optøs ved stuetemperatur, hvis flasken omrystes regelmæssigt for at resuspendere indholdet. Temperaturer over 37 °C kan forringe serumets ydeevne ved at fremskynde nedbrydningen af kritiske serumfaktorer og bør derfor undgås. Optøet serum skal blandes omhyggeligt, før det tilsættes cellekulturmediet.

• Hvad er de udfældninger, der kan ses i serum?

  Efter optøning kan der forekomme udfældninger og uklarhed i serumet. Det er fibrinudfældninger.
  Hvis serumet inkuberes ved 37 °C i længere tid, kan der ud over fibrin også dannes calciumfosfatudfældninger.
  Så vidt vi ved, påvirker ingen af delene serumets ydeevne i cellekultur.

• Hvad er den detaljerede protokol for varmeinaktivering af serum?

  Serum varmeinaktiveres for at inaktivere de komplementfaktorer, der findes i serumet. Under varmeinaktiveringen overvåges produkttemperaturen med en kontrolflaske ud over den flaske, der skal anvendes til cellekultur. Flaskerne optøs ved +2 °C til +8 °C og placeres derefter i et vandbad ved +80 °C. Når temperaturen i kontrolflasken når +50 °C, indstilles vandbadets termostat til +70 °C.
  Når flaskens temperatur når +55 °C, sænkes termostaten til +60 °C. Når kontrolflasken når +56 °C, indstilles termostaten til +56 °C, og serumet inkuberes i 30 minutter. Omryst flasken hvert 5. til 10. minut, og kontrollér temperaturen regelmæssigt. Hold temperaturen på +56 °C ved at justere termostaten, tilsætte koldt vand eller anvende låget. Efter inkuberingen afkøles serumet ved stuetemperatur i 30 minutter og fryses derefter ved -20 °C.

  Bemærk: Omrøring er afgørende for serumets kvalitet. Hvis serumet ikke blandes korrekt, kan der dannes udfældninger af salte, proteiner og lipider, som kan give serumet et gelagtigt udseende. Udfældningerne er ikke toksiske for cellekulturen, men påvirker serumets udseende og konsistens. Inkubation ved +56 °C i mere end 30 minutter kan beskadige vækstfaktorerne og dermed reducere serumets ydeevne.

• Hvor længe kan serum opbevares ved +2 °C til +8 °C?

  Serum kan opbevares ved +2 °C til +8 °C i op til otte uger uden reduceret ydeevne (*).

  (*) Art to Science, bind 19, nr. 2, “Serum Stability at Refrigerated Temperatures (2-8C)”

• Hvad er den anbefalede opbevaringstemperatur for serum?

  Serum skal opbevares frosset ved -20 °C, inden for intervallet -10 °C til -40 °C, og beskyttet mod lys. Ved temperaturer under -40 °C kan flaskerne blive skrøbelige, hvilket øger risikoen for brud.

• Er der forskel på serum fra forskellige oprindelser?

  Serum af høj kvalitet kan komme fra ethvert land, forudsat at det indsamles, importeres og forarbejdes i overensstemmelse med alle gældende myndigheds- og industrikrav. Intet kontinent eller FBS-producerende land har en iboende kvalitetsmæssig fordel i forhold til andre oprindelser.

• Hvilken betydning har et lands status for mund- og klovesyge (FMD) for serum?

  Mund- og klovesyge er relevant i forbindelse med myndighedskrav til import, men har ingen betydning for cellevækst. Enkelte lande, herunder USA, tillader kun import af FBS fra lande, der er fri for FMD uden vaccination, mens de fleste andre lande også accepterer FMD-frie lande med vaccination.

  Mund- og klovesyge er endemisk i dele af Asien samt i store dele af Afrika og Mellemøsten. De fleste latinamerikanske lande har indført zoneinddeling og er anerkendt som fri for FMD med eller uden vaccination.

  Australien, New Zealand, Indonesien, Mellemamerika, Nordamerika og Vesteuropa er aktuelt fri for FMD. Sygdommen er dog grænseoverskridende og kan forekomme sporadisk i områder, der normalt er sygdomsfri. (https://www.woah.org/fr/maladie/fievre-aphteuse/)

• Hvad er TSE/BSE, og hvilke risici er forbundet med dem?

  Transmissible spongiforme encephalopatier (TSE) er kroniske neurodegenerative sygdomme, der er kendetegnet ved ophobning af en unormal isoform af et cellulært glykoprotein, kaldet PrP eller prionprotein. TSE hos dyr omfatter blandt andet bovin spongiform encephalopati (BSE) hos kvæg og scrapie hos får og geder.

  Kvæg, får, geder og andre dyr, der naturligt er modtagelige for infektion med TSE-agens, eller som kan smittes oralt, bortset fra mennesker og ikke-menneskelige primater, defineres som dyrearter af særlig relevans for TSE. Det omfatter blandt andet hjortedyr, mink, kattedyr og eksotiske hovdyr. Svin og fugle, som er særligt relevante ved fremstilling af lægemidler, er ikke modtagelige for naturlig oral infektion.

  (Uddrag af “Explanatory note concerning the reduction of the risk of transmission of animal spongiform encephalopathy agents by medicinal products for human and veterinary use (EMA/410/01 rev. 3)”).

  Ifølge OIE er der ingen risiko for overførsel af BSE via en række produkter, herunder mælk, huder og skind, udbenet kød, blod og blodbaserede biprodukter som føtalt bovint serum (OIE Terrestrial Code 11.4 BSE). De fleste OIE-medlemslande har tilsluttet sig denne vurdering, herunder EU og USA (USDA).

• Hvorfor ikke kun anvende PCR-test til virus?

  En almindelig PCR-test kan påvise DNA og RNA fra både levende og døde virus. For at påvise levende virus skal PCR-testen kombineres med cellekulturtest.

• Hvorfor bestråles serum nogle gange, og hvordan påvirker det ydeevnen?

  Gammastråling kan eliminere en potentiel risiko fra virus, bakterier og svampe, der måtte være til stede i serumet. Bestrålingen medfører ikke ændringer i den biokemiske sammensætning eller en væsentlig reduktion af produktets ydeevne. Serumet kan dog fremstå mørkere end ubestrålet serum. Biowest anbefaler, at serumet testes på de relevante anvendelser på forhånd.

  Biowest tilbyder også Biopharm FBS af høj kvalitet, som er certificeret fri for ni væsentlige bovine virus.

Andre sera

• Hvad er bovint serum?

  Serum er den flydende komponent, der udvindes fra koaguleret eller defibrineret fuldblod efter centrifugering. Det fremstilles af blod fra tamkvæg, som indsamles på slagteriet under nøje kontrollerede forhold. Processen er grundigt udviklet og anvender avancerede faciliteter og udstyr. Den ledsages af omfattende test, som er særligt stringent, når det forarbejdede bovine serum skal anvendes til fremstilling af lægemidler.

• Hvor kommer bovint serum fra?

  Bovint serum er et biprodukt fra kødindustrien. Det kan indsamles ved slagtning af voksent kvæg, kalve eller nyfødte kalve. Det kan også fremstilles fra levende donordyr, som afgiver blod mere end én gang.

• Hvordan testes bovint serum for virus?

  Biowest tester serum for virus som BVD, IBR og PI3 ved hjælp af en cellekulturmetode for at påvise tilstedeværelse eller fravær af levende virus i serumet.

• Hvorfor vælge blodgruppe AB til humant serum?

  Humant serum fra donorer med blodgruppe AB mangler antistoffer mod blodgruppe A- og B-antigener. Det minimerer derfor immunreaktiviteten, hvilket er relevant, da de fleste brugere af humant serum arbejder med celler fra immunsystemet.

Oprindelse og sporbarhed

• Hvad gør Biowest til specialist i cellekultur?

  Med mere end 35 års erfaring med serum som kerneområde skiller Biowest sig ud gennem sit fokus på kvalitet og service. Takket være virksomhedens vertikale integration tilbyder Biowest verdens bredeste udvalg af geografiske oprindelser og er dermed en central specialist inden for cellekultur.

  Biowest samarbejder tæt med forskningslaboratorier, akademiske institutioner og medicinalvirksomheder verden over. Ved at levere cellekulturmedier af høj kvalitet, tilpasset det enkelte projekts behov, spiller Biowest en vigtig rolle i videnskabelige opdagelser, kliniske forsøg og udviklingen af nye behandlinger.

  Biowest adskiller sig gennem sit engagement i en vertikalt integreret forsyningskæde, der opfylder de højeste standarder for kvalitet, sporbarhed og sikkerhed. I 2004 blev virksomheden opkøbt af Serascandia-koncernen og blev dermed den første vertikalt integrerede serumvirksomhed.

  Samme år indberettede Biowest tilfælde af fejlagtige deklarationer til myndighederne og informerede de berørte parter. Virksomheden fremhævede betydningen af retningslinjer og sporbarhedskontrol i serumindustrien og støttede etableringen af ISIA (International Serum Industry Association) og ESPA (European Serum Producers Association). Det viser Biowests engagement i professionel etik og ansvarlig praksis i serumindustrien.

• Punkt 2

  Dette er en undertitel.

  Indhold indsættes her.